反义寡核苷酸药物（ASO）是目前研究较多的核酸类药物，而核苷酸序列确认是ASO质控中的重要环节。本文介绍了应用台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-8020快速测定反义寡核苷酸药物的核苷酸序列的案例，通过对ISD（源内裂解）模式产生的碎片离子进行分析，实现ASO核苷酸序列的确认。该方法操作简便，图谱简单易解析。