使用超高效液相色谱三重四极杆质谱仪联用系统，建立了血清中皮质醇含量测定方法。使用标准品及质控品进行了方法的线性、准确度及精密度的考察。结果显示该方法线性良好，标准曲线相关系数大于0.999；连续测定6次质控品回收率在95.3%~104.7%之间，RSD在2.1%~3.5%之间，满足临床测定需求。该方法前处理简便，样本用量少，分析速度快，灵敏度高，专属性强，对库欣综合征及肾上腺皮质功能减退症的筛查诊断具有重要参考意义。