本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用系统测定葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量的方法。5-羟甲基糠醛在优化后的色谱及质谱条件下，采用正离子模式进行电离，通过多反应监测(MRM)模式对目标化合物进行测定。结果表明：使用外标法定量，5-羟甲基糠醛在0.010 μg/mL~1.0 μg/mL线性范围内峰面积与其质量浓度线性关系良好，所得校准曲线线性相关系数均在0.999以上，各校准点准确度分别在88.0% ~ 103.9%之间，且精密度和回收率实验结果良好。