本文参照《中华人民共和国药典（2020年版）》四部通则“0722 维生素D测定法 第四法”，使用基于LC-40搭建的中心切割二维液相色谱系统，建立了维生素D制剂中维生素D的测定方法。系统适应性溶液连续分析结果显示：第一维液相色谱中维生素D理论塔板数为5815~5948，前维生素D和维生素D的分离度为7.54~7.81，第二维色谱图中维生素D和前维生素D与附近峰的分离度均大于1.5，满足药典系统适用性要求；对照品溶液重复进样测试结果显示：前维生素D和维生素D保留时间RSD为0.04%~0.14%，峰面积RSD为1.28%~1.85%。结果表明，该方法有效、可靠，可应对相关分析需要。