本文使用高效液相色谱仪建立了婴幼儿配方乳粉中维生素B6的分析方法。方法采用C18色谱柱，使用外标法定量，吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺在0.020 μg/mL-1.0 μg/mL浓度范围内，线性相关系数大于0.9995，仪器检出限均在0.13 ng/mL~0.92 ng/mL范围内，仪器定量限均在0.39 ng/mL~2.80 ng/mL范围内。使用0.040 μg/mL、0.20 μg/mL、0.60 μg/mL的标准溶液分别连续进样6针，保留时间的RSD在0.049%~0.12%之间，峰面积的RSD在0.14%~2.44%之间。婴幼儿配方乳粉中的维生素B6加标回收率在91.95%~100.39%之间。该方法满足《GB 5009.154-2023食品安全国家标准 食品中维生素B6的测定（第三法）》方法要求，可为相关从业人员提供参考。