本文建立了高效液相色谱法测定乳制品中烟酸和烟酰胺含量的方法。样品参照食品安全国家标准《GB5009.89-2023 食品中烟酸和烟酰胺的测定》中的前处理方式，进行提取、上机分析。结果显示烟酸和烟酰胺在0.3~20.0 μg/mL浓度范围内具有较好的线性关系，线性相关系数r均大于0.9998，定量限分别为0.022 μg/mL和0.027 μg/mL，校准曲线准确度在95.6%~107.9%之间。分别使用0.3 μg/mL的两种物质标准品溶液混合液连续进样6针，保留时间RSD在0.03%~0.04%之间，峰面积RSD在1.15%~1.63%之间，系统精密度良好。加标奶粉的加标回收率在98.88%~112.33%之间。实验表明，该方法完全满足国家标准中的各项规定，可用于乳制品中烟酸和烟酰胺的检测。