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使用BioSpec-nano定量蛋白质
2022.08.02类型: 应用报告浏览:22
蛋白质溶液中包含表面活性剂、还原剂、变性剂等各种共存物质,这些物质会影响定量分析,需要选择适合样品的分析方法。紫外吸收法(测定280 nm处的光密度(OD))是使用分光光度法定量总蛋白浓度的最简单的方法。该技术基于蛋白质中的芳香族氨基酸在280 nm时的具有紫外吸收特性,无需预处理,分析操作简单。但是,不同种类的蛋白质即使浓度相同,吸光度也有所差异,此外,当存在核酸等在相同波长范围内有光吸收的物质时,定量会受到影响。相比之下,BCA法(BCA:Bicinchoninic Acid)是一种在不同蛋白质之间显色差异较小的蛋白定量方法。该方法的原理是Cu(I)离子在蛋白质存在的条件下会与二喹啉甲酸配位键合显示紫色,浓度范围大,灵敏度高。
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