本文建立并验证一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三生四极杆质谱仪LCMS-8050联用测定人血浆中纳美芬的方法。方法采用同位素内标法定量，方法定量限10pg/mL，线性范围为10～10000 pg/mL，相关系数在0.9992。方法选择实验表明空白血浆中不存在明显干扰；方法的日内精密度2.37～6.06%，日间精密度2.56～7.52%，各浓度水平质控样品的准确度88.3～112.3%，能够很好地满足血浆中药物浓度准确定量的要求；各浓度水平质控样品纳美芬的回收率均大于80%，基质效应因子均大于85%，内标归一化基质效应因子 均在105%左右；另外，系统残留率考察结果表明高浓度样品分析后在系统中的残留量不影响低浓度样品的定量准确性，关于同位素内标对纳美芬定量准确性的考察表明同位素肉桂不会影响纳美芬的准确定量。方法具有分析速度快、灵敏高、重复性好的特点，适合血浆中纳美芬含量的快速检测，满足低给药剂量时（30ug）药代动力学研究的需要。