本应用建立了三重四极杆液质联用仪测定婴幼儿奶粉中核苷酸的方法。在优化后的色谱及质谱条件下，采用正离子模式扫描，通过多反应监测(MRM)模式对目标化合物进行测定。结果表明：胞嘧啶核苷酸（CMP）、鸟嘌呤核苷酸（GMP）和次黄嘌呤核苷酸（IMP）在2 ng/mL ~ 1000 ng/mL浓度范围内，尿嘧啶核苷酸（UMP）在4 ng/mL ~ 2000 ng/mL浓度范围内，腺嘌呤核苷酸（AMP）在0.8 ng/mL ~ 400 ng/mL浓度范围内线性关系良好，所得校准曲线相关系数均在0.999以上，各校准点准确度在91.9%~110.8%之间，且精密度和回收率实验结果良好。