本文建立了使用岛津液相色谱串联质谱LCMS-8045测定饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的方法。饲料用甲醇提取，经混合型阳离子固相萃取小柱净化后，用超高效液相色谱LC-40进行分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8045进行定性和定量分析。盐酸沃尼妙林和泰妙菌素在2 μg/L~500 μg/L浓度范围内线性良好，标准曲线的相关系数r大于0.9994；对2.0、20和200 μg/L低中高不同浓度的标准工作液连续测定6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.18%~0.26%和1.11%~2.86%之间；添加浓度为80和400 μg/kg饲料样品（上机浓度为 2和10 ng/mL），回收率在73.4~88.5%之间，该方法可适用于饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的测定。